单克隆抗体定制服务
武汉天德生物生物为您提供专业的单克隆抗体制备服务,包括抗原制备,细胞融合筛选,亚克隆,单抗制备等。我们根据抗原性质、数量、纯度,选择最佳的免疫方案;并通过HAT选择培养基筛选融合细胞,并对融合细胞进行ELISA阳性筛选及亚克隆;筛选出的阳性单克隆,取腹水,用Protein A/G抗体纯化柱纯化抗体,纯化后的抗体ELISA效价>1: 128, 000,纯度>90%。天德会为您定制适用您下游应用的方案并交付高质量的单克隆抗体,交付的单抗可以用于免疫组化、ELISA、体外诊断检测等下游实验。
服务内容
交付内容
2-5株阳性克隆;
1~3mg单克隆抗体;
项目报告(包括项目流程报告、SDS-PAGE及ELISA等质检报告);
抗原选择
客户可以自由选择蛋白、多肽等作为抗原。您可以提供抗原,也可以提供抗原序列,由天德 负责抗原的制备。
蛋白抗原:天德拥有丰富的抗原表达经验及先进的纯化技术,确保得到的抗原尽可能接近天然结构。
多肽抗原:我们将针对特定的蛋白结合位点序列设计并合成多肽,在设计时会考虑多肽的亲水性、表面可接触性、抗原倾向性等因素,保证多肽的高质量。
蛋白抗原 VS 多肽抗原
抗体识别的抗原表位有构象表位和线性表位两种,利用蛋白作为抗原制备的抗体两种表位都可以识别,得到的抗体下游应用广泛。而利用多肽制备出的抗体只能识别线性表位,不能够保证得到的抗体可以识别天然蛋白;对于需要识别抗原构象表位的下游实验(CO-IP、FACS等)利用多肽制备的抗体也很难完成。
关于抗体效价
单克隆抗体制备操作很容易,但是获得高质量的单抗很难。天德 承诺:交付的抗体,测得的抗体效价>1:128,000。
按阶段分步骤的标准单克隆抗体服务流程 | |
阶段一 |
通过规范化免疫接种程序免疫5只Balb/c小鼠。用ELISA测定血清滴度。大约需要20mg蛋白免疫原或10mg偶联KLH或者 BSA的多肽 作为免疫原和2.0mg多肽作为筛选抗原用。(武汉天德 生物可提供多肽合成和多肽偶联技术) |
阶段二 | 当血清中抗体滴度达到融合要求后,收鼠脾脏细胞与骨髓瘤细胞进行融合,ELISA方法检测杂交瘤细 胞培养上清液。筛选出抗体阳性的杂交瘤细胞克隆。 |
阶段三 |
阳性克隆通过有限稀释进行多次克隆化,(若需要,也提供抗Ig的亚型鉴定)。提供客户3 株以上单克隆细胞,并选取1株生产腹水(若需要,也可三株都生产腹水) |
结果交付:为客户提供3个以上克隆杂交瘤细胞株,每个克隆提供2-5ml腹水。
需时:3-6个月
项目 | 参考价格(¥) |
60005单克隆抗体制备(全程服务) | 25000 |
60006腹水和抗体制备(5mg抗体) | 1000 |
相关服务 | |
抗原筛选 | 免费 |
60001多肽合成 | 见多肽合成 |
60007半抗原(多肽)与KLH的标记 | 550 |
60007半抗原(多肽)与BSA的标记 | 550 |
Western Blotting(WB)实验 | 80 |
腹水生产
提供代客户制备腹水服务:用balb/c小鼠生产腹水;平均每只小鼠能收获-25ml;抗体浓度通常在0.5-5mg/ml之间;
结果交付:根据客户要求,提供所需要抗体的量;
价格:根据客户需要的数量而定。
抗体纯化
按所要求的纯度采用相应的纯化方法。提供盐析、凝胶过滤、亲和层析和离子交换层析等步骤达到纯化的目的。
结果交付:根据客户要求,提供所需要抗体的量。
价格: 根据客户需要的数量而定。